细胞STR鉴定服务是一种基于短串联重复序列(STR)基因分型技术,对细胞身份进行准确验证的服务,旨在解决细胞系错误标记或交叉污染问题,确保科研和药物开发中细胞来源的可靠性。 以下是详细介绍:
细胞遗传质量检测的重要性细胞系作为正常或肿瘤组织的模式细胞,被广泛应用于科学研究和药物开发。然而,细胞系错误鉴定问题长期存在,已有50年历史。基于国际细胞库的分析数据显示,1984年细胞错误鉴定率为35%,1999年为18%,直到最近几年,应用于生物医学领域的细胞系需要鉴定的问题仍然很少有人关注。很大一部分细胞系被错误标记,或被其他个体、组织、种系来源的细胞所替代,这严重影响了科研结果的准确性和可靠性。
细胞系错误鉴定所造成的后果- 细胞系的损失:错误鉴定的细胞系可能导致实验无法继续进行,造成细胞系的直接损失。
- 时间和金钱的损失:科研人员需要花费大量时间和资金重新获取和培养正确的细胞系,增加了研究成本和时间周期。
- 在公众领域(文献,专利等)提供错误信息:错误的细胞系鉴定结果可能导致发表的科研论文、申请的专利等存在错误信息,影响学术声誉和知识产权的有效性。
- 造成实验结果不一致或不可重复:不同实验室或不同实验中使用错误鉴定的细胞系,会导致实验结果不一致或无法重复,影响科研成果的交流和应用。
- 个人和公众影响:对于个人而言,可能面临学术尴尬;对于公众而言,可能导致对科研机构的信任度下降,产生羞辱感。
细胞系鉴定与STR的关系- STR作为金标准:STR(Short Tandem Repeat,短串联重复序列)基因分型已被ICLAC、ATCC等权威机构作为金标准应用于细胞鉴定。
- STR的特点:STR基因位点由长度为3~7个碱基对的短串连重复序列组成,这些重复序列广泛存在于人类基因组中,具有高度多态性,被称为细胞的DNA指纹。
- 鉴定原理:STR基因座位上的等位基因可通过扩增区域内重复序列的拷贝数的不同来区分。在毛细管电泳分离之后,可通过荧光检测来识别。随后通过一定的计算方法,根据所得的STR分型结果与细胞STR数据库比对,从而推算出样品所属的细胞系或可能的交叉污染的细胞系名称。因此,应定期进行细胞STR鉴定,确认细胞身份是否正确。
细胞系鉴定服务流程- 样本采集:从待鉴定的细胞系中采集适量的细胞样本,确保样本的代表性和完整性。
- DNA提取:使用合适的DNA提取方法,从细胞样本中提取高质量的DNA,为后续的STR分析提供基础。
- STR位点扩增:利用特异性引物对STR基因位点进行PCR扩增,增加STR片段的数量,便于后续的检测和分析。
- 毛细管电泳分离:将扩增后的STR片段通过毛细管电泳进行分离,根据片段的大小和电荷差异,将不同的STR等位基因分开。
- 荧光检测:使用荧光检测技术对分离后的STR片段进行检测,识别不同等位基因的荧光信号,获取STR分型数据。
- 结果分析与比对:将所得的STR分型结果与细胞STR数据库进行比对,分析样本的细胞来源,判断是否存在交叉污染或错误标记的情况。
- 报告生成:根据分析结果生成详细的鉴定报告,包括样本信息、STR分型图谱、比对结果和鉴定结论等内容,为科研人员提供准确的细胞身份信息。